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高效液相色谱用水

发布时间:2021-12-31


嗨!大家好,我是水问问水。

高效液相色谱(以下简称“HPLC”)是实验室分析的重要手段,原理是:以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对样品的定性定量分析。

小伙伴日常操作HPLC时总会遇到形形色色的问题,例如师兄曾跟我抱怨:刚买的色谱柱,过了3次就废了!!!为此师兄做了各种复盘,一次次重新制样……然而这些都是无用功,因为我们都忽略了两个字——液体。

流动相是液体、样品是液体、空白也是液体,这些液体都离不开H2O。然而,此H2O并不是简简单单的水。

自然界中的水由H2O和others构成,others对于HPLC来说就是污染物,这些污染物包含了:离子,有机物,颗粒胶体,微生物,气体。近年来实验室分析设备的灵敏度普遍增强,其所能容许的污染物质的量越来越低,实验用水的纯度要求打个比方,就如同“317世纪中的一秒“一般。

1ppm=1g/1m³(相当于11.5天中的1秒)

1ppb=1g/1000m³(相当于32年中的1秒)

ppt=1g/1000000m³(相当于317世纪中的一秒)

如此高纯度的要求,逼得人类造出了超纯水,来适应分析仪器(例如HPLC)日益升高的“敏感度“,简直是个高需求宝宝啊(扶额)!

超纯水的制造过程,需要将自来水中的离子去除,使得电阻率升高至18.2MΩ.cm@25℃,减少配样用水中离子对样品的干扰;除此还要尽量降低有机物的含量至5ppb以下,好减少检测结果的误差;残留的小细菌小颗粒也不能忽略,因为它们会引发HPLC管路及泵的故障(当然短期内你不会发现,它们都是默默累积直到“病发“);气体也会在进入系统前被直接脱去,否则会影响有效体积。

好水除了能养好人,还能养好机器,更能帮你高效实验(师兄辛苦了!),当你的HPLC出现问题找不到原因时,记得排查下你的水是否用对了哦!



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